不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究（MSM2013實(shí)驗(yàn)用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究（MSM2013實(shí)驗(yàn)用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究（MSM2013實(shí)驗(yàn)用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究（MSM2013實(shí)驗(yàn)用膜分離裝置）不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究（MSM2013實(shí)驗(yàn)用膜分離裝置）

不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究

尹利端1，王桐1，宋文山2，劉楚怡2，3，*，仲米存1，杜芬2，李八方2，3

（1.煙臺(tái)新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)有限公司，山東煙臺(tái)264006；2.青島海洋生物醫(yī)藥研究院，山東青島266001；3.中國(guó)海洋大學(xué)，山東青島266073）

摘 要：通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)不同分子量松花肽的增強(qiáng)**力活性進(jìn)行研究。從松花粉粕中制備平均分子量在1 kDa～3 kDa和小于1 kDa范圍的兩種松花肽，分析其氨基酸組成，進(jìn)而研究?jī)煞N分子量松花肽在增強(qiáng)細(xì)胞**、體液**和單核-巨噬細(xì)胞**功能上的活性。研究發(fā)現(xiàn)，兩種分子量的松花肽，都具有顯著增強(qiáng)細(xì)胞**功能、增強(qiáng)體液**功能和增強(qiáng)單核-巨噬細(xì)胞功能的作用。綜上所述，小于1kDa松花肽和1kDa～3kDa松花肽，都具有增強(qiáng)**力的功能。

關(guān)鍵詞：松花粉；松花肽；分子量；增強(qiáng)**力；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2019.03.011

作者簡(jiǎn)介：尹利端（1979—），男（漢），工程師，碩士，研究方向：功能食品的研究、開(kāi)發(fā)與產(chǎn)業(yè)化。

*通信作者：劉楚怡（1986—），女（漢），博士，研究方向：新資源食品及其功能性研究與開(kāi)發(fā)。

Study on Immune Function Enhancing of Mouse with Different Molecular Weights of Peptides from Pine Pollen

YIN Li-duan1，WANG Tong1，SONG Wen-shan2，LIU Chu-yi2，3，*，ZHONG Mi-cun1，DU Fen2，LI Ba-fang2，3
（1.Yantai New Era Health Industry Chemical Co.，Ltd.，Yantai 264006，Shandong，China；2.Marine Biomedical Research Institute of Qingdao，Qingdao 266001，Shandong，China；3.Ocean University of China，Qingdao 266073，Shandong，China）

Abstract：Animal experiments were conducted to study the enhanced immunity activities of different molecular weight peptides from pine pollen.Two kinds of pine pollen peptides with an average molecular weight of 1 kDa-3 kDa and less than 1 kDa were prepared from pine pollen residues.The amino acid composition was analyzed，and the cellular immunity，humoral immunity，and mononuclear-macrophage immune functional activity of pine pollen peptides were studied.The studies had found that two molecular weights of pine pollen peptides had a significant role in enhancing cellular immunity，enhancing humoral immunity，and enhancing mononuclear macrophage function.In summary，both of the peptides had the function of enhancing immunity.

Key words：pine pollen；pine pollen peptide；molecular weight；enhancement of immune function；animal experimenty

引文格式：

尹利端，王桐，宋文山，等.不同分子量松花肽增強(qiáng)小鼠**力的功能研究[J].食品研究與開(kāi)發(fā)，2019，40（3）：61-65

YIN Liduan，WANG Tong，SONG Wenshan，et al.Study on Immune Function Enhancing of Mouse with Different Molecular Weights of Peptides from Pine Pollen[J].Food Research and Development，2019，40（3）：61-65

松花粉是指經(jīng)人工采集得到的干燥松樹(shù)花粉，作為生命的遺傳物質(zhì)，含有豐富的蛋白質(zhì)、微量元素、黃酮及必需脂肪酸等營(yíng)養(yǎng)成分[1]及生物活性物質(zhì)[2]，具有抗衰老、抗氧化、抗疲勞、促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、調(diào)整機(jī)體代謝等多種功效[3]。目前松花粉水提物的制備技術(shù)已相對(duì)成熟，并形成了國(guó)珍松花粉等一系列在售產(chǎn)品。但在松花粉水提物的制備過(guò)程中，卻產(chǎn)生了大量的松花粉粕殘?jiān)?，這些殘?jiān)羞€存在著大量上等的蛋白質(zhì)資源尚未得到充分利用。一般認(rèn)為松花粉中蛋白質(zhì)勝于酪蛋白，且質(zhì)量高于牛肉、雞***白[4]。簡(jiǎn)單的丟棄松花粉粕不僅會(huì)帶來(lái)環(huán)境的壓力，也造成了大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的浪費(fèi)。因此，**高效的從松花粉粕中制備具有生物活性的松花肽，成了亟待解決的問(wèn)題。目前國(guó)內(nèi)關(guān)于從松花粉粕中制備活性松花肽的研究未見(jiàn)報(bào)道，利用松花粉粕開(kāi)發(fā)具有生物活性的松花肽，具有重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。

生物活性肽就是指一類相對(duì)分子質(zhì)量小于6 kDa，介于氨基酸與蛋白質(zhì)之間的分子聚合物[5]，具有增強(qiáng)機(jī)體防御功能、調(diào)節(jié)生命節(jié)律、預(yù)防**和促進(jìn)康復(fù)等多種生物學(xué)功能的多肽[6]。具有增強(qiáng)**功能的活性肽稱作**活性肽[7]。近年來(lái)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些天然**活性膚如胸腺膚等，可誘導(dǎo)**細(xì)胞分化、增殖與成熟，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力[8]，提高機(jī)體對(duì)外界病原物質(zhì)的抵抗能力，提高**低下小鼠的**活性[9]。部分**活性肽已經(jīng)作為一種**因子應(yīng)用于醫(yī)學(xué)臨床抗感染、**缺乏癥的**上，并且起到了良好的**效果[10]。

本研究從松花粉粕中制備1 kDa～3 kDa和小于1 kDa兩種分子量的松花肽，并按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》（2003版）[11]要求，對(duì)兩種平均分子量松花肽的增強(qiáng)**力功能進(jìn)行了研究。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

松花粉粕：山東煙臺(tái)新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)有限公司；胰蛋白酶（10 000 U/g）：南寧龐博生物工程有限公司；無(wú)水乙醇（分析純）、氫氧化鈉（分析純）、三***（分析純）、三氟乙酸（分析純）、硫化鈉（分析純）、乙腈（色譜純）：北京化學(xué)試劑公司；3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴鹽 [3-（4，5-dimethyl-2-thiazolyl）-2，5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，MTT]、牛血清蛋白、維生素B12、谷胱甘肽及膠原蛋白：Sigma公司；Giemsa液：索萊寶公司。

Agilent 1260高效液相色譜儀、Agilent 1100型氨基酸自動(dòng)分析儀：美國(guó)安捷倫公司；MSM2013實(shí)驗(yàn)室用膜分離設(shè)備：上海摩速科學(xué)器材有限公司；UV-2010PC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：尤尼克（上海）儀器有限公司；Versamax Tunable Microplate Reade光柵式恒溫酶標(biāo)儀：Versamax Tunable公司；BX43熒光顯微鏡：Olympus公司。

SPF級(jí)昆明小鼠：山東朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育有限公司。